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改良十六烷基三甲基溴化铵-磁珠核酸提取方法及在植物转基因检测中的应用

论文摘要

目的建立一种快速、高效、便捷的植物基因组DNA提取方法并运用于植物转基因检测。方法改良传统的十六烷基三甲基溴化铵（cetyltrimethylammonium ammonium bromide,CTAB）方法,并结合磁珠吸附基因组DNA,配合核酸自动提取系统提取水稻和加工米粉中的核酸,荧光聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）检测Bt63大米转基因成分,并与另外4种提取方法的结果进行对比,评价提取效果。结果 5种不同方法中CTAB-磁珠法提取的样品基因组DNA浓度和质量最佳,荧光PCR检测低浓度Bt63转基因成分（0.01%）的Ct值最小,检测结果最好。结论该方法可高效快速地提取植物核酸,在低含量的转基因成分检测中相比其他几种方法具有绝对优势。

论文目录

  • 1 引言
  • 2 材料与方法
  •   2.1 仪器、试剂和材料
  •   2.2 实验方法
  •     2.2.1 改良CTAB-磁珠法
  •     2.2.2 CTAB法、SDS法和试剂盒法
  •     2.2.3 DNA质量和浓度测定
  •     2.2.4 实时荧光PCR检测转基因成分
  • 3 结果与分析
  •   3.1 基因组DNA的提取结果
  •   3.2 基因组DNA中大米转基因成分的实时荧光PCR检测
  • 4 结论与讨论

    • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 权永兵,黄永辉,徐淼锋,廖力,林伟,张卫东

    关键词: 基因组提取,植物转基因检测

    来源: 食品安全质量检测学报 2019年23期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑

    专业: 轻工业手工业

    单位: 拱北海关技术中心,广东茂名农林科技职业学院

    基金: 质检总局科技计划项目(2017IK030),拱北海关科技计划项目(ZH2017-24)~~

    分类号: TS207.3

    DOI: 10.19812/j.cnki.jfsq11-5956/ts.2019.23.041

    页码: 8042-8047

    总页数: 6

    文件大小: 1202K

    下载量: 342

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    本文来源: https://www.lunwen66.cn/article/c8ea6d39c00dc0dc516883b0.html