目的:苯扎溴铵在医疗卫生等行业中被广泛使用,导致了细菌的抗性。本研究了苯扎溴铵对不同生长时期肠球菌菌毛基因和黏附因子表达的影响;同时探索了微生态模型中苯扎溴铵条件下的肠球菌耐药性及各群体感应系统间的相互关系。方法:（1）设立5个苯扎溴铵浓度组（1000,500,100,10,0ng/mL）,分别用对培养至对数中期（3.5 h）、对数后期（5 h）及稳定期（7h）的肠球菌对猪小肠上皮细胞（IPEC-J2）进行黏附,并用qPCR法测肠球菌的菌毛相关基因和黏附因子的mRNA相对表达情况。（3）建立水域微生态模型。设置苯扎溴铵终浓度分别为2000 ng/mL、200 ng/mL、20 ng/mL、2 ng/mL和0 ng/mL的梯度。定期检测水样中肠球菌的药敏表型、耐药基因和抗性基因,同时检测其fsr群体感应系统和cyl群体感应系统相关基因的mRNA相对表达量。结果:（1）黏附实验结果显示,肠球菌各生长时期对宿主细胞的黏附作用具有差异性,对数期的黏附能力强于稳定期,低浓度组的黏附性强于高浓度组;低浓度（10 ng/mL）苯扎溴铵对菌毛生成相关基因ebpA、ebpB、ebpC和srtA基因的上调作用主要体现在对数中期,而ebpR影响较大的是较高浓度组的稳定期;gelE基因的表达主要在后期,且较低苯扎溴铵浓度可以显著提高其表达;对数中期随着苯扎溴铵浓度的增加（100～1000 ng/mL）,ace的mRNA表达随苯扎溴铵浓度的增加而增加,对数后期则相反。（2）微生态系统中,第7天时肠球菌对8种药物的MIC值明显增加,并对VAN、CHL、BB、CIP、ERY和TET产生耐药性,tetL和ermB等耐药基因于1 d时检出。fsrABC基因几乎不表达,但下游的gelE和sprE的表达明显上调;cylLL和cylLS的表达量远高于其他cyl相关组分基因;前21天两者表达量相当,28 d后者显著高于前者;其他cyl基因后期均被抑制。结论:（1）苯扎溴铵能显著提高肠球菌在生长对数中期的黏附能力。低浓度苯扎溴铵对宿主细胞的黏附能力与菌毛生成量有关,高浓度主要通过刺激黏附基因ace的高表达影响其黏附。（2）亚抑菌浓度下苯扎溴铵诱导肠球菌耐药性,其对fsr群体感应系统相关基因fsrABC基因表现为完全抑制作用。
类型: 国内会议
作者: 吴丽云,李晓东,汪艳秋,洪娟,刘灿,欧正阳,俞道进
关键词: 苯扎溴铵,肠球菌,群体感应系统,耐药性
来源: 中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十五次学术讨论会 2019-10-13
年度: 2019
分类: 基础科学,农业科技
专业: 生物学,畜牧与动物医学
单位: 福建农林大学动物科学学院福建省兽医中药与动物保健重点实验室
分类号: S852.611
DOI: 10.26914/c.cnkihy.2019.034688
页码: 253-254
总页数: 2
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