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MAPREC与MNVT评价Ⅲ型Sabin株脊髓灰质炎病毒神经毒力的比较

论文摘要

目的用PCR扩增及限制性酶切分析突变技术（MAPREC）和猴体神经毒力试验（MNVT）评价同一批Ⅲ型Sabin株脊灰病毒神经毒力的结果差异。方法采用MAPREC技术,检测Ⅲ型Sabin株脊灰病毒神经毒力关键位点472位点突变率;采用MNVT病理切片分析,评价Ⅲ型Sabin株脊灰病毒神经毒力。结果 MAPREC检测待测样品核酸472位点突变率均值为0.324%,低于高突变参考品的0.621%。MNVT切片结果分析表明,xtest–xref=0.169,小于C1。对同一批样品,MAPREC与MNVT分析结果一致。结论在Ⅲ型Sabin株脊灰病毒神经毒力检测方面,操作简单,试验周期短的MAPREC技术可作为金标准MNVT的有益补充。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 标准品及样品
  •     1.1.2 主要仪器及试剂
  •     1.1.3引物探针序列
  •     1.1.4 实验动物
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 MAPREC检测III型Sabin脊灰病毒472-C突变率
  •       1.2.1. 1 RNA提取与反转录制备c DNA
  •       1.2.1.2非对称PCR最佳模板浓度筛选[4]
  •       1.2.1.3突变率检测
  •     1.2.2 猴体神经毒力实验[5-6]
  •       1.2.2. 1 样品稀释
  •       1.2.2. 2 猴体免疫
  •       1.2.2. 3 组织切片染色计分
  •   1.3 统计学处理
  • 2 结果
  •   2.1 最佳PCR模板浓度筛选
  •   2.2 定量突变率检测
  •   2.3 猴体神经毒力实验切片分析
  •   2.4 猴体神经毒力实验数据分析
  • 3 讨论

    • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 李娜,丁玲,马萌,孙千一,王红燕,李拓

    关键词: 神经毒力,型株脊髓灰质炎病毒,分子水平,动物水平

    来源: 中国医药生物技术 2019年06期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技,基础科学

    专业: 生物学,基础医学

    单位: 北京生物制品研究所有限责任公司质量检定室,北京生物制品研究所有限责任公司疫苗4室

    基金: “重大新药创制”国家科技重大专项(2018ZX09737008)

    分类号: R373.22

    页码: 494-499

    总页数: 6

    文件大小: 1053K

    下载量: 25

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    本文来源: https://www.lunwen66.cn/article/e85fb2f54b2c3c79758074a1.html