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大叶铁线莲ISSR反应体系的建立与优化

论文摘要

以秦岭野生大叶铁线莲为试验材料,在单因素试验的基础上进行L9（34）正交试验,从而优化大叶铁线莲ISSR-PCR反应体系。结果显示,在25μL反应体系中,最佳体系为1.0μL模板DNA、2.0μL Mg2+、2.0μL dNTPs、1.0μL引物以及0.2μL Taq DNA聚合酶和18.8μL ddH2O。最佳扩增程序为:94℃预变性5 min;94℃变性50 s,47℃退火1 min,72℃延伸1 min,35个循环;72℃延伸10 min,最后4℃保存。

论文目录

  • 1 材料和方法
  •   1.1 试验材料
  •   1.2 试验方法
  •     1.2.1 DNA的提取及检测
  •     1.2.2 引物的筛选
  •     1.2.3 ISSR-PCR反应单因素试验
  •     1.2.4 ISSR-PCR反应正交试验
  • 2 结果与分析
  •   2.1 DNA的制备
  •   2.2 引物的筛选
  •   2.3 ISSR-PCR反应体系优化
  •     2.3.1 基因组DNA浓度对ISSR-PCR反应体系的影响
  •     2.3.2 Taq酶浓度对ISSR-PCR反应体系的影响
  •     2.3.3 dNTPs浓度对ISSR-PCR反应体系的影响
  •     2.3.4 Mg2+浓度对ISSR-PCR反应体系的影响
  •     2.3.5 ISSR-PCR反应正交试验
  • 3 结论与讨论

    • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 任夏萌,李欣怡,丁群英

    关键词: 大叶铁线莲,提取

    来源: 山西农业科学 2019年12期

    年度: 2019

    分类: 农业科技

    专业: 农作物

    单位: 西安文理学院生物与环境工程学院

    基金: 国家级大学生创新创业训练计划项目(201811080015),西安市科技计划项目(2019KJWL16)

    分类号: S567.239

    页码: 2083-2087

    总页数: 5

    文件大小: 1445K

    下载量: 124

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    本文来源: https://www.lunwen66.cn/article/ef1ffb683deb6869b2da1076.html