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人WDR79基因启动子表达载体的构建及鉴定

论文摘要

人WDR79是一种重要的支架蛋白,在端粒酶组装、卡哈尔体（Cahar body）形成和DNA损伤修复等过程中发挥着重要作用。采用PCR扩增技术获得人WDR79基因启动子上游DNA序列,构建人WDR79基因启动子荧光素酶报告基因载体pGL3-WDR79-promoter;通过双酶切、琼脂糖凝胶电泳、DNA测序和荧光素酶活性测定等实验手段,验证质粒pGL3-WDR79-promoter构建的正确性及其表达活性。本研究结果为进一步探讨人WDR79基因表达的调控机制奠定实验基础。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 实验材料
  •     1.1.2 试剂
  •     1.1.3 实验仪器
  •   1.2 实验方法
  •     1.2.1 人基因组DNA提取
  •     1.2.2 人WDR79基因启动子表达载体p GL3-WDR79-promoter构建及鉴定
  •     1.2.3 细胞培养与质粒转染
  •     1.2.4 荧光素酶实验
  •     1.2.5 数据统计分析
  • 2 结果与分析
  •   2.1 PCR扩增人WDR79基因启动子
  •   2.2 重组质粒p GL3-WDR79-promoter的构建
  •   2.3 重组质粒p GL3-WDR79-promoter双酶切鉴定
  •   2.4 质粒p GL3-WDR79-promoter活性鉴定
  • 3 讨论

    • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 杨潮,何小杨,莫淑芳,戴京,张欣宇,陈慧

    关键词: 启动子克隆,荧光素酶活性检测

    来源: 井冈山大学学报(自然科学版) 2019年03期

    年度: 2019

    分类: 基础科学

    专业: 生物学

    单位: 赣南师范大学生命科学学院

    基金: 国家自然科学基金项目(81660491,81402304),江西省自然科学基金项目(20161BAB215221),赣南师范大学大学生创新创业训练计划项目(15zb08)

    分类号: Q782

    页码: 31-34+55

    总页数: 5

    文件大小: 856K

    下载量: 48

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    本文来源: https://www.lunwen66.cn/article/fce252304ca3c578732659ec.html